应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 有什么办法和酶可以防止dUTP扩增，而仅扩增dNTP
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 2051  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

抽象派单纯

新虫 (初入文坛)

[交流] 有什么办法和酶可以防止dUTP扩增，而仅扩增dNTP 已有3人参与

最近想做一个筛选。

想问下大家，有没有什么办法或者酶可以比较高特异性的识别T碱基和U碱基， 当体系中原料是dNTP时可以正常扩增，而换成dUTP时则无法扩增，当然，反过来也可以，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-09-13 21:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加入 UNG酶就可以了， 根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶
赞一下(1人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2020-09-14 08:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: originally posted by pennchem at 2020-09-14 08:05:25
加入 ung酶就可以了， 根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶

我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。
赞一下(1人) 回复此楼
核酸提取与Taqman诊断
3楼2020-09-14 10:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抽象派单纯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2020-09-14 10:14:50
我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。...

请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？ 比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？ 如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？
赞一下 回复此楼
4楼2020-09-14 12:44:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2020-09-16 05:17:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 抽象派单纯 at 2020-09-14 12:44:57
请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？ 比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？ 如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？...

你用Taq、Tth、Pfu、KOD这些酶做出来的才叫PCR，

既然用pfu，又怎么会能做恒温扩增呢
赞一下 回复此楼
核酸提取与Taqman诊断
6楼2020-09-17 08:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 抽象派单纯 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +5 路痴小琪 2026-03-27 5/250 2026-03-27 13:09 by yhmsz
[考研] 275求调剂 +5 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:52 by lature00
[考研] 311求调剂 +7 lin0039 2026-03-26 7/350 2026-03-27 12:42 by 果果妈咪
[考研] 322求调剂 +3 旧吢 2026-03-24 3/150 2026-03-27 11:42 by sanrepian
[考研] 299求调剂 +8 shxchem 2026-03-20 10/500 2026-03-27 11:27 by sanrepian
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +7 钮恩雪 2026-03-25 7/350 2026-03-27 04:28 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭