应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 有什么办法和酶可以防止dUTP扩增，而仅扩增dNTP
61/1返回列表
查看: 2234  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

抽象派单纯

新虫 (初入文坛)

[交流] 有什么办法和酶可以防止dUTP扩增，而仅扩增dNTP 已有3人参与

最近想做一个筛选。

想问下大家，有没有什么办法或者酶可以比较高特异性的识别T碱基和U碱基， 当体系中原料是dNTP时可以正常扩增，而换成dUTP时则无法扩增，当然，反过来也可以，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-09-13 21:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加入 UNG酶就可以了， 根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶
赞一下(1人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2020-09-14 08:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: originally posted by pennchem at 2020-09-14 08:05:25
加入 ung酶就可以了， 根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶

我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。
赞一下(1人) 回复此楼
核酸提取与Taqman诊断
3楼2020-09-14 10:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抽象派单纯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2020-09-14 10:14:50
我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。...

请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？ 比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？ 如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？
赞一下 回复此楼
4楼2020-09-14 12:44:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2020-09-16 05:17:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 抽象派单纯 at 2020-09-14 12:44:57
请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？ 比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？ 如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？...

你用Taq、Tth、Pfu、KOD这些酶做出来的才叫PCR，

既然用pfu，又怎么会能做恒温扩增呢
赞一下 回复此楼
核酸提取与Taqman诊断
6楼2020-09-17 08:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 抽象派单纯 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 08:59 by 6vVgjDL4CnGu
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:21 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭