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求学。

新虫 (初入文坛)

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专业: 植物资源学

[求助] 农杆菌转化

我是讲载体与目的基因酶切后链接转入大肠杆菌感受态细胞中，摇菌提质粒后双酶切验证条带也没问题，用验证过的质粒采用冻融法转EH105农杆菌，在含卡娜和利福平的平板上培养，长单菌落，挑完摇菌后菌液pcr却没有条带，，重复3次，别人带了一次，别人菌有带我的还是没有，求各位大神帮忙分析一下问题所在，感谢

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1楼 2020-07-13 22:35:08

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新艺

新虫 (小有名气)

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虫号: 1101066
注册: 2010-09-16
专业: 食品科学基础

楼主，您好，请问你们用的农杆菌转化的质粒是哪一个？近期我们也想做农杆菌介导转化，想问一下是否可以交换质粒？购买也可以。我们实验室有真菌转化常用质粒pAN7-1（氨苄和潮霉素抗性）和pCT74（氨苄和潮霉素抗性，有荧光蛋白），其次，还有2个谷氨酸棒状杆菌表达质粒。
我的qq：547709812
邮箱zxy19880920@163.com