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yuzhongbaihe新虫 (正式写手)
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[交流]
如何把两个基因克隆在一个载体上
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有做过双基因共载体的大神们吗？想请教一下具体细节如何把两个基因整合到一个载体上 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2020-07-11 20:53:45
haoziying
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提前分析两个目的基因的酶切位点，选择mcs的靠前位置的位点连接，也可以在设计两段目的基因的引物时加入酶切位点（该酶不切目的基因），通过两次克隆连接。串联表达。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2020-07-12 05:50:01
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7楼2020-07-12 12:22:02
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9楼2020-07-12 13:05:41
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（1）想把两个蛋白同时表达在一起（表达成一个融合蛋白），这个可以加linker可以实现 （2）如果两个蛋白表达出来，在第一个蛋白TAA结尾，第二个蛋白ATG开头，原来是TAA ATG， 可以缩为 TAA TG，这样ribosome在中止第一个阅读框后，马上遇到起始子ATG，继续进行翻译。 |
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yuzhongbaihe10楼2020-07-13 08:14:27
3楼2020-07-11 20:58:33
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4楼2020-07-11 21:04:50
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我们是想把2个杀虫蛋白构建到自己改造的一个载体上，所以第2种方法肯定不能用了，第一种方法我还是不太理解呢，我这两个基因都是3000多bp的，肯定不能全部都克隆上去？能给再说的具体些吗？ 发自小木虫Android客户端 |
5楼2020-07-11 22:19:09
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8楼2020-07-12 12:51:24