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yuzhongbaihe

新虫 (正式写手)

[交流] 如何把两个基因克隆在一个载体上

有做过双基因共载体的大神们吗?想请教一下具体细节如何把两个基因整合到一个载体上

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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)


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通过Gibson组装,你如果想两个基因共用一个启动子,第二个基因ATG和前一个基因TAA之间记得加上RBS;如果各自带启动子,扩增出载体,基因1和启动子,基因2和启动子后三个片段组装。
9楼2020-07-12 13:05:41
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pennchem

专家顾问 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
(1)嵌合,两个在同一个启动子和终止子中间,第一个基因以TAA结束,而第二个基因以ATG开始,所以嵌合处序列为 TAA(TG)

(2)用pDuet质粒,有两个MCS,各插入一个基因
行至水穷处,坐看云起时
2楼2020-07-11 20:53:45
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匿名


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
3楼2020-07-11 20:58:33
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pennchem

专家顾问 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
分别表达自己的,不会互相干扰

蛋白相互作用,那是表达折叠之后的事情了
行至水穷处,坐看云起时
4楼2020-07-11 21:04:50
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