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载体构建
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我想把一个5000多的 片段连到一个植物表达载体CAMBIA1300(8000多的)里,做了好几个月了 ,热击电击都试过了,感受态也用了好几个人的,虽然有时长出来过,可抽提质粒后跑电泳,大小都不对。 使用的酶是BamHI 和 HindIII,5000的片段是克隆到T载体上双酶切下来的。1300的多克隆位点和T载体一样,双酶切后,回收(天根的回收试剂盒),连接(开始用的是TAKARA的T4连接酶,后来用Fermantas 的),热击或电击,涂板。 做了N次,怎么都不行,请各位虫子帮帮忙。 |
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6楼2009-08-29 20:47:39
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