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载体构建
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我想把一个5000多的 片段连到一个植物表达载体CAMBIA1300(8000多的)里，做了好几个月了 ，热击电击都试过了，感受态也用了好几个人的，虽然有时长出来过，可抽提质粒后跑电泳，大小都不对。 使用的酶是BamHI 和 HindIII，5000的片段是克隆到T载体上双酶切下来的。1300的多克隆位点和T载体一样，双酶切后，回收（天根的回收试剂盒），连接（开始用的是TAKARA的T4连接酶，后来用Fermantas 的），热击或电击，涂板。 做了N次，怎么都不行，请各位虫子帮帮忙。 |
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