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飞不动D鸟

新虫 (初入文坛)

[求助] 利用cre/loxp系统进行酵母基因的敲除

我想对酵母的一个基因进行敲除,看的参考文献好像都是采用的cre/loxp系统进行的敲除,可是我对cre/loxp敲除组件的构建还有不懂的地方,主要是在引物的设计的方面。比如说我做酵母的ERG4基因的敲除,敲除引物说是,5’端的45个碱基与酵母的ERG4基因同源重组,3’端大概有20个bp的碱基与质粒pUG6的基因两侧的上下游的基因序列相同,包括loxp位点,从而把两者将结合起来连接成完整的引物。这个引物具体应该怎么设计,因为找了好多的文献都没有讲到设计方案的,有没有大佬可以指点一下。
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forhighbio

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这个方法比较慢,酵母可以用 cas系统敲除

发自小木虫Android客户端
2楼2020-06-12 09:26:38
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