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利用cre/loxp系统进行酵母基因的敲除
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| 我想对酵母的一个基因进行敲除，看的参考文献好像都是采用的cre/loxp系统进行的敲除，可是我对cre/loxp敲除组件的构建还有不懂的地方，主要是在引物的设计的方面。比如说我做酵母的ERG4基因的敲除，敲除引物说是，5’端的45个碱基与酵母的ERG4基因同源重组，3’端大概有20个bp的碱基与质粒pUG6的基因两侧的上下游的基因序列相同，包括loxp位点，从而把两者将结合起来连接成完整的引物。这个引物具体应该怎么设计，因为找了好多的文献都没有讲到设计方案的，有没有大佬可以指点一下。 |
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