24小时热门版块排行榜    

查看: 1719  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Thfinding

新虫 (初入文坛)

[求助] 单抗用抗体需要做冻干处理吗? 已有1人参与

本人科研白一枚。最近在做单抗。在免疫小鼠这一步中,许多文献都给了精确的免疫用量,楼主最终确定了200μg,200μL/只的剂量。可遇到测蛋白浓度的问题。用BCA、BrandFord、Lowry和磺基水杨酸法测蛋白浓度都需要标准品,用OD测又不准。所以想用冻干法提纯出蛋白后再将蛋白溶解于生理盐水或PBS中。
问题来了:是否有必要将抗原冻干处理?如果不冻干,有没有其他方法可以精确测没有标准品的蛋白浓度?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buzhidaoren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

即便测出精确的浓度实际意义也不太大,更多的是需要自己摸索免疫剂量
4楼2020-06-30 13:55:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

kakaakaka

铁虫 (初入文坛)

请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了
2楼2020-05-23 15:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Thfinding

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kakaakaka at 2020-05-23 15:52:42
请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了

把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度,而用上述方法又测不出浓度,就想要做冻干。没有经验,所以来小木虫求高人指点了

发自小木虫Android客户端
3楼2020-05-24 15:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Thfinding at 2020-05-24 15:55:25
把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度,而用上述方法又测不出浓度,就想要做冻干。没有经验,所以来小 ...

每种含量测定的方法确实有差别,只要免疫的蛋白量大于等于资料中说的就可以,个人觉得。也听别人说过的免疫的量小于我们常见的,这个还需要自己摸索。
I am not a hero , but I served with heroes!
5楼2020-08-03 13:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收留调剂 +3 jiang姜66 2026-03-14 4/200 2026-03-14 22:23 by sunny9211
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分,求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010,总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 304求调剂(085602一志愿985) +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
[考研] 0817找调剂 +6 kk扛 2026-03-08 6/300 2026-03-09 06:38 by houyaoxu
[考研] 一志愿211 材料与化工 280求调剂 +3 Sanity蒋 2026-03-08 3/150 2026-03-09 06:35 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见