24小时热门版块排行榜    

查看: 1700  |  回复: 4

Thfinding

新虫 (初入文坛)

[求助] 单抗用抗体需要做冻干处理吗? 已有1人参与

本人科研白一枚。最近在做单抗。在免疫小鼠这一步中,许多文献都给了精确的免疫用量,楼主最终确定了200μg,200μL/只的剂量。可遇到测蛋白浓度的问题。用BCA、BrandFord、Lowry和磺基水杨酸法测蛋白浓度都需要标准品,用OD测又不准。所以想用冻干法提纯出蛋白后再将蛋白溶解于生理盐水或PBS中。
问题来了:是否有必要将抗原冻干处理?如果不冻干,有没有其他方法可以精确测没有标准品的蛋白浓度?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kakaakaka

铁虫 (初入文坛)

请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了
2楼2020-05-23 15:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Thfinding

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kakaakaka at 2020-05-23 15:52:42
请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了

把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度,而用上述方法又测不出浓度,就想要做冻干。没有经验,所以来小木虫求高人指点了

发自小木虫Android客户端
3楼2020-05-24 15:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buzhidaoren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

即便测出精确的浓度实际意义也不太大,更多的是需要自己摸索免疫剂量
4楼2020-06-30 13:55:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Thfinding at 2020-05-24 15:55:25
把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度,而用上述方法又测不出浓度,就想要做冻干。没有经验,所以来小 ...

每种含量测定的方法确实有差别,只要免疫的蛋白量大于等于资料中说的就可以,个人觉得。也听别人说过的免疫的量小于我们常见的,这个还需要自己摸索。
I am not a hero , but I served with heroes!
5楼2020-08-03 13:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Thfinding 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 求调剂 +3 snw石 2026-03-07 3/150 2026-03-07 20:01 by houyaoxu
[基金申请] 成果系统访问量大,请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便,敬请谅解。 +16 xhuama 2026-03-02 19/950 2026-03-07 19:34 by 雪霓裳
[考研] 274求调剂 +7 cgyzqwn 2026-03-01 14/700 2026-03-07 14:51 by Miko19
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学0856材料与化工,前三科206,总分283,求调剂 +7 26考研求调剂 2026-03-06 7/350 2026-03-07 14:49 by Miko19
[考研] 一志愿华中科技大学,化学专业344分,求调剂 +7 邢xing1 2026-03-02 7/350 2026-03-06 09:14 by guoweigw
[考研] 332材料求调剂 +6 zjy101327 2026-03-05 7/350 2026-03-06 00:18 by wutongshun
[考博] 26申博-目前4篇SCI一作 +4 chen_2024 2026-03-02 4/200 2026-03-05 22:59 by sicilyl0001
[考研] 083000,总分284,求调剂 +3 徐yr 2026-03-04 3/150 2026-03-05 22:33 by Y比B卜
[考研] 334求调剂 +3 Trying] 2026-03-03 4/200 2026-03-05 16:39 by zhukairuo
[考研] 纺织、生物、化学、材料等专业 +3 Eember. 2026-03-05 7/350 2026-03-05 16:35 by Eember.
[考研] 290求调剂 +5 Bananaiy 2026-03-04 5/250 2026-03-05 13:43 by 给你你注意休息
[论文投稿] 主编终审卡者不动 100+4 Stray2021 2026-03-03 4/200 2026-03-05 08:04 by bdhaoxiang
[考研] 085600求调剂 +4 LRZZZZZZ 2026-03-02 6/300 2026-03-04 09:11 by 无际的草原
[考研] 0703化学学硕 288分 +4 旅行中的紫葡萄 2026-03-03 4/200 2026-03-03 23:41 by ch1979
[考研] 293求调剂 +4 是乐渝哇 2026-03-03 4/200 2026-03-03 23:04 by zhukairuo
[考研] 278求调剂 +3 满天星11_22 2026-03-02 3/150 2026-03-03 13:51 by Iveryant
[论文投稿] 通讯作者写谁,问题是你意想不到的问题 15+3 阿尔法啊 2026-03-01 3/150 2026-03-03 09:13 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
信息提示
请填处理意见