应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 单抗用抗体需要做冻干处理吗？
51/1返回列表
查看: 1691  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Thfinding

新虫 (初入文坛)

[求助] 单抗用抗体需要做冻干处理吗？ 已有1人参与

本人科研白一枚。最近在做单抗。在免疫小鼠这一步中，许多文献都给了精确的免疫用量，楼主最终确定了200μg，200μL/只的剂量。可遇到测蛋白浓度的问题。用BCA、BrandFord、Lowry和磺基水杨酸法测蛋白浓度都需要标准品，用OD测又不准。所以想用冻干法提纯出蛋白后再将蛋白溶解于生理盐水或PBS中。
问题来了：是否有必要将抗原冻干处理？如果不冻干，有没有其他方法可以精确测没有标准品的蛋白浓度？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-05-16 20:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kakaakaka

铁虫 (初入文坛)
请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了
赞一下 回复此楼
2楼2020-05-23 15:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Thfinding

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kakaakaka at 2020-05-23 15:52:42
请问楼主是怎么后来是怎么做的呢,刚刚开始做抗原不知道后面怎么处理了

把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度，而用上述方法又测不出浓度，就想要做冻干。没有经验，所以来小木虫求高人指点了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2020-05-24 15:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buzhidaoren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

即便测出精确的浓度实际意义也不太大，更多的是需要自己摸索免疫剂量
赞一下 回复此楼
4楼2020-06-30 13:55:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Thfinding at 2020-05-24 15:55:25
把抗原提纯之后用考染和WB检测一下。然后用超滤或者透析提纯。再后来就是我问的要不要做冻干了。因为目前我查到的免疫小鼠的资料都有明确的抗原浓度，而用上述方法又测不出浓度，就想要做冻干。没有经验，所以来小 ...

每种含量测定的方法确实有差别，只要免疫的蛋白量大于等于资料中说的就可以，个人觉得。也听别人说过的免疫的量小于我们常见的，这个还需要自己摸索。
赞一下 回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes！
5楼2020-08-03 13:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Thfinding 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 英一数二272求调剂 5+3 vida_a 2026-03-01 7/350 2026-03-02 07:51 by ms629
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +3 hit_aiot 2026-03-01 5/250 2026-03-02 07:48 by 得鹿梦鱼111
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 13/650 2026-03-02 07:27 by 好好好1233
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭