| 查看: 1340 | 回复: 8 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
xuguang09280036新虫 (初入文坛)
|
[交流]
有关水稻愈伤组织诱导的问题
|
||
| 我做 水稻的组织培养 需要诱导出 水稻的愈伤组织 但每次诱导出来的愈伤都比较碎 软软的 正常的比较好的是致密的 小块状 激素加的是2，4-D，琼脂粉浓度是0.8%的。 希望做过类似实验的高手 给些指点 谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有5人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有74人回复
-
岩土工程学报什么时候才能终审完呐
已经有4人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有25人回复
-
2027广东省杰青
已经有6人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
8楼2009-07-10 12:53:49
2楼2009-07-09 10:53:30
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎交流！ 7-9 11:46
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎交流！ 7-9 11:46
|
1. 水稻种子70％乙醇消毒1min后，用无菌水洗干净。 2. 用含有Tween20（50mL加一滴）『50uL的枪一滴』的次氯酸钠（2.5％）消毒15min，然后用无菌水冲洗5次 3. 重复上一步（不含Tween20） 4. 无菌水稻种子放置在N6D的固体培养基（琼脂糖7.2g/L）,光照培养32度5天。 1. 农杆菌EHA105在AB固体培养基上划线培养（加抗生素）28度培养3天。 2. 用AAM培养基冲洗下来，摇动0.5小时，静置0.5小时 3. 将种子悬浮在AAM培养基中，轻幌1.5min（稍多一点） 4. 用无菌滤纸吸干多余的菌液 5. 转移到已经用AAM培养基浸泡过的直径9cm的滤纸上（500uL），然后放到2N6-AS固体培养基上（琼脂糖7.2g/L），25度黑暗共培养3天。 6. 种子用无菌水冲洗5次，然后用含有500mg/L的羧苄无菌水冲洗掉农杆菌。（冲洗30min，摇动10min静止10min反复） 7. 种子用滤纸擦干后，放置在含有50mg/L的潮霉素和400mg/L的羧苄的N6D培养基上32度培养2周。（继代一次/周） 8. 愈伤组织长出后转移到RE-III培养基上。（继代一次/周）32度 9. 幼苗长出后转移到HF培养基上诱导生根。 10. 农杆菌EHA105在AB固体培养基上划线培养（加抗生素）28度培养3天。 11. 悬浮在AAM培养基中培养至OD值为0.1 12. 将种子悬浮在AAM培养基中，轻幌1.5min， 13. 用无菌滤纸吸干多余的菌液 14. 转移到已经用AAM培养基浸泡过的直径9cm的滤纸上，然后放到2N6-AS固体培养基上（04％琼脂糖），25度黑暗共培养3天。 15. 种子用无菌水冲洗5次，然后用含有500mg/L的羧苄无菌水冲洗掉农杆菌。 16. 种子用滤纸擦干后，放置在含有50mg/L的潮霉素和400mg/L的羧苄的N6D培养基上32度培养2周。 17. 愈伤组织长出后转移到RE-III培养基上。 18. 幼苗长出后转移到HF培养基上诱导生根。  |
3楼2009-07-09 11:02:53
4楼2009-07-09 11:03:28
