应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 植物DNA提取如何让质量更好？
151/2返回列表12下一页
查看: 1140  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yucca2081

铁虫 (小有名气)

[交流] 植物DNA提取如何让质量更好？

提取一种植物的总DNA：(1)电泳出来总是有很明显的托尾，疑是DNA已经剪切；(2)加样孔很亮；(3)DNA含量低；(4)检测分光光度比值不理想。提取高手来说说应怎样改进？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 20:57 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-07-05 16:34:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weizhenlin

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先你的说明是什么植物，用的什么方法，别人才好理解。从你的结果看，多糖和蛋白含量很高。最好先把你的方法贴出来看看，大家在提建议。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-07-05 16:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herwan

木虫 (知名作家)

★游离希★
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 7-8 22:41
同意楼上的说法！
拖尾现象在提取DNA的时候恩容易出现
主要是由于操作上不当
研磨植物的时候没有保证持续的低温
最理想的状态应该是研磨完之后是一种干粉的状态
要是已经化了而粘到了离心管壁上，肯定拖尾！
赞一下(6人) 回复此楼
最让偶感动的一句话：“如果你愿意，你可以随时离开!"偶就这样被征服了~~~于是心中紧记“生死契阔，与子相悦；执子之手，与子偕老”！
3楼2009-07-05 16:59:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Lz说的不清楚啊。。。。。
同意1楼的说法啊
赞一下(1人) 回复此楼
加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
4楼2009-07-05 22:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucca2081

铁虫 (小有名气)
谢谢几个楼上朋友。我提取的是裸子植物柳杉DNA，CTAB方法，氯仿异戊纯抽提蛋白质。
托尾现象3楼说的极是，但提取干燥样品时是用磨样机打碎，期间都是粉末状，同样也有托尾？
另外，如果粘到壁上有托尾是什么原因造成的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2009-07-07 13:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucca2081

铁虫 (小有名气)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):鼓励一下！ 7-8 22:41
具体步骤是这样的：
    (1)称取0.05g硅胶干燥的叶片在磨样机中粉碎30s，加入1 ml冰里预冷的洗脱缓冲液(不含CTAB的抽提液)，离心。两次。
    (2)加入750μl预热至65℃的CTAB抽提液，65℃水浴90min。期间每隔10-15 min上下颠倒几次eppendorf管。
    (3)加入等体积(750μl)的氯仿一异戊醇(24:1)，离心。（3次）
    (4)取上清加入4μl 10 mg/ml的RNaseA. 37℃水浴30min。
    (5)取上清液加入2倍体积的冰异丙醇（-20℃），1/3体积5M NaCI溶液，-20℃冰箱静置2h。
    (6)沉淀离心15min。将液体小心从eppendorf管中倒出，取DNA沉淀。
    (7)70%乙醇离心。弃上清。重复一次。自然风干。
    (8)加1×TE缓冲液，溶解DNA沉淀。
赞一下(6人) 回复此楼
6楼2009-07-07 13:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

momoofo

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
推荐用酚：氯仿1：1洗一次 效果会好不少
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-07-07 14:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucca2081

铁虫 (小有名气)
谢谢momoofo!
使用酚－氯仿洗还需要氯仿－异戊醇洗吗？
如果需要，酚－氯仿是在其之前还是之后？请明示
赞一下 回复此楼
8楼2009-07-07 16:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
点样孔很亮说明蛋白很多，你应该好好抽提一下。蛋白拖尾一般都是糖较多。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-07-08 09:11:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucca2081

铁虫 (小有名气)
曾经试过抽提5次，上清剩的聊聊无几，但点样孔仍然很亮
赞一下 回复此楼
10楼2009-07-08 15:26:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yucca2081 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭