24小时热门版块排行榜    

查看: 1757  |  回复: 8
当前主题已经存档。

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 菌液PCR与普通PCR有啥区别!

请问各位虫友菌液PCR与普通PCR在操作时有什么区别吗?!有啥需要特别注意的吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

一个人可以不成功,但不可以不成长!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孔乙己

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没什么区别,就是模板不同,普通PCR以纯化后的DNA为模板,菌落PCR也菌为模板,PCR是菌液PCR的变性时间应略长于普通PCR。呵呵,你是不是在做阳性克隆鉴定啊?
愿大家共同进步
2楼2009-06-25 08:58:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一个是加煮沸的菌液 一个是加纯DNA模板
菌液PCR不是很可靠, 一般筛选的时候用
并且可能有非特异性扩增(假阳性),而且有个时候明明有 就是P不出来
所以  一般我筛选也尽量不用菌液PCR
菌液PCR最大的优点当然是省时省事咯
注意菌液PCR作模版的时候 加量币普通PCR要多点 因为模版浓度太低
一般3-5微升(50微升体系)
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
3楼2009-06-25 09:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzhzhc

银虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在第一步变性的时候时间稍长,例如4 min 左右。
接下来的循环 按正常的设置就可以了。
4楼2009-06-25 09:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

savetheday

银虫 (小有名气)

没有区别,
Godbless
5楼2009-06-25 10:30:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

Thank you very much to 以上各位,小弟明白啦!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
6楼2009-06-25 10:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liouwzh

木虫 (正式写手)

菌液PCR跟不同的菌也有关系,有的菌如大肠就比较好做,有的就比较难,要提基因组再PCR
7楼2009-06-26 14:03:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanlili

金虫 (正式写手)


菌液PCR通常要的酶要多一点,因为相比DNA来说,杂质更多一些,先变性10min
8楼2009-06-26 14:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是阳性菌的话,菌液PCR之前最好先煮沸5-10min,阴性菌直接把菌悬液当模板加就可以了,可以适当延长预变性时间
菌液PCR杂质会较多,产物检测时可能会有RNA和蛋白,如果要回收产物的话最好低电压跑长胶……
9楼2009-06-27 08:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Anson1358 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂; 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +6 wana_kiko 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂;
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见