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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

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[交流] 菌液PCR与普通PCR有啥区别！

请问各位虫友菌液PCR与普通PCR在操作时有什么区别吗？！有啥需要特别注意的吗？

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一个人可以不成功，但不可以不成长！

1楼 2009-06-25 08:49:57

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孔乙己

银虫 (正式写手)

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没什么区别，就是模板不同，普通PCR以纯化后的DNA为模板，菌落PCR也菌为模板，PCR是菌液PCR的变性时间应略长于普通PCR。呵呵，你是不是在做阳性克隆鉴定啊？

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愿大家共同进步

2楼2009-06-25 08:58:50

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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

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一个是加煮沸的菌液一个是加纯DNA模板
菌液PCR不是很可靠，一般筛选的时候用
并且可能有非特异性扩增（假阳性），而且有个时候明明有就是P不出来
所以一般我筛选也尽量不用菌液PCR
菌液PCR最大的优点当然是省时省事咯
注意菌液PCR作模版的时候加量币普通PCR要多点因为模版浓度太低
一般3-5微升（50微升体系）

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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！

3楼2009-06-25 09:00:44

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