应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 这样的PCR产物可以测序吗
281/3返回列表123下一页
查看: 2102  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

sm2008

金虫 (小有名气)

[交流] 这样的PCR产物可以测序吗

请大家帮我看看这样的PCR产物可以测序吗？我送上海生工，工作人员告诉说纯化后还测不出来，我已经用不同的退火温度（49-65度），总是这个样子。

[ Last edited by 350784478 on 2009-6-24 at 22:15 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-24 22:12:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

herot

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从条带亮度看，切胶纯化再测问题应该不大，但是也不排除pcr引物测序不太合适的问题。
连接到载体里再测是最保险的，就是费事点。
赞一下(2人) 回复此楼
树欲静而风不止
7楼2009-06-25 10:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
连接 T载体再去测序吧.呵呵,有些许的拖尾
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-06-24 22:13:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sm2008

金虫 (小有名气)
谢谢二楼，我有18个不同的样品要测呀，做连接工作量有点大。
赞一下 回复此楼
3楼2009-06-24 22:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR 产物直接测序是比较难的，最好就是连接进载体，上下游序列都是已知的，非常容易测序
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-06-25 08:21:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaochong0101

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
18个不算多啊，我做的比你多多了，都是连接后测序，这样保险啊。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-06-25 08:32:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没啥不可以的，直接送去就可以，大致测下浓度，还要附送引物及引物浓度。invitrogen就能测。PCR产物最好纯化一下。
赞一下(1人) 回复此楼
金币是赌出来的
6楼2009-06-25 09:03:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forget1997

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这样的亮度，纯化 （割胶 或者 直接用回收试剂盒）测序绝对是没有问题的。
侧不出来，有可能是引物不太好。试着设计内引物来测序。
连接、克隆测序完全没有必要。工作量要大很多倍，尽管效果可能更好 （克隆测序普遍背景更干净）。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2009-06-25 13:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
胶回收，连t载体，再测序
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-06-25 14:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sm2008

金虫 (小有名气)
谢谢楼上的各位，我在生工测，他说测不出，各位能否推荐个好一点的测序公司呀？
赞一下 回复此楼
10楼2009-06-25 14:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sm2008 的主题更新
281/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭