24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 995  |  回复: 9
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 xiaofan66 的 7 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaofan66

[交流] 菌液PCR后,出现非特异条带,是怎么回事?

蓝白斑筛选后,挑白斑进行菌液PCR后(PCR时,10uL体系,取1uL菌液作为模板),出现非特异条带(如图),我使用的是目的片段的引物,目的片段大约500bp,可是在2000bp以上,出现了明亮的条带,是哪步出现了问题?

由于是隔天照的照片,MARKER效果不好,条带在2000bp以上。

[ Last edited by 350784478 on 2009-6-22 at 16:09 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weilin2378

木虫 (小有名气)


xiaofan66(金币+1):谢谢参与
做菌液PCR时细菌的浓度不需要很大。我一般是摇菌3-5小时(大肠),然后取1微升菌液进行PCR(20微升体系)。
5楼2009-06-22 20:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

350784478

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
xiaofan66(金币+1):谢谢参与
xiaofan66(金币+1,VIP+0):能在具体些么,是哪一步操作剧烈了 6-22 16:14
xiaofan66(金币+1,VIP+0): 6-22 16:14
有可能是你太激烈吹打,导致你的目的基因条带某处断裂,随后经PCR,产生这样的结果。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2009-06-22 16:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)

★ ★
xiaofan66(金币+2,VIP+0):咱们站内短信联系 6-22 16:22
比如你在混匀的时候,可能是激烈振荡,导致断裂,经常有这样的情况。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
3楼2009-06-22 16:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
xiaofan66(金币+1):谢谢参与
xiaofan66(金币+1,VIP+0): 6-22 17:10
我建议你做菌落pcr试试,要不就提细菌dna做模版
4楼2009-06-22 16:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272分材料子求调剂 +36 Loy0361 2026-04-10 47/2350 2026-04-12 02:25 by mfyue2000
[考研] 332求调剂 +14 蕉蕉123 2026-04-10 14/700 2026-04-12 00:27 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 086000调剂 +5 十七sa 2026-04-07 5/250 2026-04-11 10:38 by 紫曦紫棋
[考研] 求调剂288 +6 ioodiiij 2026-04-10 8/400 2026-04-10 21:07 by zhouxiaoyu
[考研] 287求调剂 +15 Fnhc 2026-04-07 21/1050 2026-04-10 19:09 by chemisry
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 085404 298分求调剂 +10 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 11/550 2026-04-10 16:44 by wangy0907
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 284求调剂 +7 让我上岸吧阿西 2026-04-09 7/350 2026-04-09 18:59 by haironglove
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 求调剂 +8 吃口冰激凌 2026-04-07 8/400 2026-04-09 08:03 by 5268321
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考博] 材料方向考博,求推荐 +3 言语aaa 2026-04-05 4/200 2026-04-08 22:22 by nxgogo
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 085405软件工程301分求调剂,专硕可跨专业,四六级已过 +3 静静想想 2026-04-05 3/150 2026-04-06 15:23 by nepu_uu
信息提示
请填处理意见