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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » pcp20质粒转化
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求学1

新虫 (小有名气)

[求助] pcp20质粒转化 已有3人参与

求助各位大神，red同源重组后，转化pcp20质粒到大肠去除km抗性，但是一直都转不进去，电转和热激都尝试了，都不行，不知道什么原因，请各位大神施于援手

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1楼 2020-01-02 14:39:38
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求学1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by KM石头 at 2020-01-04 14:30:49
我觉得楼主可以考虑试剂纯度的问题，转化时试剂纯度不够，可能会影响转化效率。还有水，用好一点的水，可以试试哇哈哈。使用的玻璃器皿要干净，清洗完成后使用超声清洗，再自然晾干
...

好的，非常感谢

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8楼2020-01-04 15:24:48
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先确定质粒有没有问题（是否是pCP20，浓度有多高），另外转化后复苏和涂板的抗性和温度是否有问题，转化pKD46效率低的倒是有，pCP20转化率低的挺少的。
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2楼2020-01-02 17:59:42
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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3楼2020-01-02 18:00:52
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
crispr敲除会比较方便快捷

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4楼2020-01-02 21:11:49
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