应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR溶解曲线双峰
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2196  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

苏拉醒了

木虫 (小有名气)

[求助] PCR溶解曲线双峰 已有1人参与

有一对引物，之前用的一直是好的，溶解曲线单峰，扩增效率也符合要求
但最近不知为什么，突然变成了双峰，且订了新的引物再试也是双峰，扩增效率也很差
试了提高退火温度，没有太大改善，各位虫友有遇到这种情况吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-12-13 14:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苏拉醒了

木虫 (小有名气)
有人遇到类似问题吗
赞一下 回复此楼
4楼2019-12-13 21:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

lansong9783

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
双峰位置？两次都是同一批cDNA吗，再用之前的cDNA试一次。是不是掺入了DNA污染
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

苏拉醒了
2楼2019-12-13 14:18:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苏拉醒了

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lansong9783 at 2019-12-13 14:18:52
双峰位置？两次都是同一批cDNA吗，再用之前的cDNA试一次。是不是掺入了DNA污染

本来溶解曲线峰值出现在87度，现在在83度左右有了一个峰，cDNA用了之前的也用了新逆转录得到的，但是都没改善。我现在也怀疑是DNA污染，但是为什么我同时做看家基因就没有问题呢。。。
赞一下 回复此楼
3楼2019-12-13 14:40:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198903

铜虫 (初入文坛)
可能是RNA浓度过高或者过低逆转录造成的。引物本身也不是很好。试试新贝生物的R202逆转录mix和Q204 qpcr mix可能有惊喜

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2019-12-16 17:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +13 新时代材料 2026-03-27 13/650 2026-03-29 01:16 by 544594351
[考研] 材料与化工272求调剂 +9 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 9/450 2026-03-28 15:21 by 1018329917
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭