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新虫 (正式写手)

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虫号: 8160133
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专业: 生物化学

[交流] RNA提取常见问题分析交流已有1人参与

1、rna得率低
a.样品裂解或匀浆处理不彻底
b.rna沉淀未完全溶解

2、a260/a280＜1.65
a.rna应使用te buffer稀释后再进行吸光度值的测定
低离子浓度和低ph值条件下a280值偏高
b.样品匀浆时加的试剂量太少
c.匀浆样品时未在室温放置5分钟
d.吸收水相时混入了有机相
e.rna沉淀未完全溶解

3、rna降解
a.组织取出后没有马上处理或冷冻
b.待提取rna的样品没有保存于-60至-70℃，而保存在了-5至-20℃
c.细胞在用胰酶处理时过度
d.溶液或离心管未经rnase去除处理
e.电泳时使用的甲醛ph值低于3.5

4、dna污染
a.样品匀浆时加的试剂量太少
b样品中含有有机试剂（如乙醇、dmso等），强缓冲液或碱性溶液

[ Last edited by 渊博震天 on 2019-11-23 at 11:17 ]

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