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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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找自己123

铁虫 (小有名气)


[交流] 原核表达蛋白进行可溶性分析时关于细胞裂解的问题

原核表达蛋白后,要做蛋白的可溶性分析,无论用超生破碎还是 裂解液,上清中总是没有任何条带,正常情况即使表达的蛋白是包涵体,上清中应该也有其他的条带呀,请问该怎么处理?
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13297913532

新虫 (正式写手)



找自己123(金币+1): 谢谢参与
纯属猜测,是不是加的裂解液太多,条带其实是有的,只是太淡了。

发自小木虫IOS客户端
3楼2019-10-29 23:31:57
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)



找自己123(金币+1): 谢谢参与
表达量太低了,结构基因需要优化

发自小木虫Android客户端
6楼2019-10-30 10:59:29
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生物二牛

铁虫 (初入文坛)



找自己123(金币+1): 谢谢参与
可能是超声破碎不完全,可以适当增加超声功率,超声时间也可适当延长,另外增加蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解。
8楼2019-11-01 14:58:29
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请叫我关关

铜虫 (初入文坛)



找自己123(金币+1): 谢谢参与
上清中一定会有蛋白表达吗 ?我做的上清中几乎看不出来条带,全在包涵体里,请问你解决这个问题了吗?如果包涵体蛋白的话,复性后对蛋白结构影响大吗?
10楼2019-11-05 14:23:22
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taro14楼
2019-10-30 00:13   回复  
找自己123(金币+1): 谢谢参与
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