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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 原核表达蛋白进行可溶性分析时关于细胞裂解的问题
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找自己123

铁虫 (小有名气)

[交流] 原核表达蛋白进行可溶性分析时关于细胞裂解的问题

原核表达蛋白后，要做蛋白的可溶性分析，无论用超生破碎还是 裂解液，上清中总是没有任何条带，正常情况即使表达的蛋白是包涵体，上清中应该也有其他的条带呀，请问该怎么处理？
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1楼 2019-10-29 23:01:25
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13297913532

新虫 (正式写手)
★
找自己123(金币+1): 谢谢参与
纯属猜测，是不是加的裂解液太多，条带其实是有的，只是太淡了。

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3楼2019-10-29 23:31:57
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★
找自己123(金币+1): 谢谢参与
表达量太低了,结构基因需要优化

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6楼2019-10-30 10:59:29
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生物二牛

铁虫 (初入文坛)
★
找自己123(金币+1): 谢谢参与
可能是超声破碎不完全，可以适当增加超声功率，超声时间也可适当延长，另外增加蛋白酶抑制剂，防止蛋白降解。
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8楼2019-11-01 14:58:29
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请叫我关关

铜虫 (初入文坛)
★
找自己123(金币+1): 谢谢参与
上清中一定会有蛋白表达吗 ？我做的上清中几乎看不出来条带，全在包涵体里，请问你解决这个问题了吗？如果包涵体蛋白的话，复性后对蛋白结构影响大吗？
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10楼2019-11-05 14:23:22
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taro14楼
2019-10-30 00:13   回复  
找自己123(金币+1): 谢谢参与
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