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桂鬼鬼材料

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质形成多聚体,如何能打开形成单体

最近在做一个蛋白,做SDS胶能看到样品很纯,但是跑Native或者分子筛发现存在很多多聚体。因为这个蛋白表面有很多带电荷氨基酸,猜测是由于静电作用。
现在别人要求蛋白必须是native胶一条带或者分子筛一个峰。
已经尝试过加SDS,精氨酸,谷氨酸,肌氨酸。 准备尝试tween-20。但是目前为止效果不太好,除了高浓度SDS。
想问一下大家有没有类似经验,怎样打开聚集体,加哪些东西可以?浓度大概多少?
而且还有一个问题是跑分子筛,这些添加剂会被稀释去除。如果去除这些添加剂后,如何避免再形成多聚? 多谢!!
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桂鬼鬼材料

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zyzolan at 2019-10-28 05:27:14
你查查百度学术

已经看过相关文献,也就是之前尝试的。就是效果不太好。。
3楼2019-10-28 05:38:53
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桂鬼鬼材料

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by Hercule9527 at 2019-11-05 03:12:49
可以试试不同盐浓度,盐浓度对蛋白聚集影响很大

这个也试过,还是不行。 不同蛋白的情况可能会不一样, 也没法弄清楚为啥聚集,很发愁。
5楼2019-12-20 02:08:00
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