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！！！求助大佬~检测基因敲入的基因组PCR（genome PCR
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引物设计在敲入位点同源臂的上、下游，之前流式检测出的敲入成功率大概是10%，我是进行分选富集之后提基因组检测的，如果敲入成功应扩增出约4600bp的片段，如果没敲入成功应扩增出约1800bp的片段，由于敲入率低，因此两个长度的条带理论上都应该P出来。但实际我只P出了1800bp的片段，4600bp的片段偶尔能隐约看到但没有说服力，这可能是PCR产物长度差异过大加上敲入率低导致的。所以想求教各位大佬，这种情况该怎么优化PCR条件才能把长片段P出来？？？先谢过大家了！！！ 发自小木虫Android客户端 |
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woshishui916
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2楼2019-10-21 21:16:51