24小时热门版块排行榜    

查看: 506  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

一生随袁

木虫 (正式写手)

[交流] 关于电泳问题

我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)

1. 没有看的很明白2.煮沸蛋白质指什么?3. SDS-PAGE有条带说明肯定是有蛋白的
4楼2009-06-03 21:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

baisuilan

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
煮沸的时候加没加SDS呢?直接煮沸法裂解细胞,我觉得裂解可能不完全吧。另外煮的太久也会使蛋白降解。通常的做法是先加裂解液裂解,离心取上清之后再加上样bufer煮
2楼2009-06-03 21:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
引用回帖:
Originally posted by 一生随袁 at 2009-6-3 20:36:
我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?

没看明白你的问题。

上样前煮沸是为了让蛋白变性,但是如果你要做质谱,蛋白样品是不能煮沸的。
煮不煮与你能不能跑的出条带是没有关系的。
不过,告诉你一个快速看胶的方法,不必完全脱色,染色半个多小时后立即放入开水中煮,直到能看到条带为止。但是,如果你要做质谱,还是老老实实的脱色。。。。
3楼2009-06-03 21:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jin56419303

木虫 (小有名气)

楼主说的不清楚,煮沸单纯作为破菌也是可以,但是蛋白肯定容易被降解,要是跑SDS-PAGE的话需要先加SDS辅助裂菌效果才好
5楼2009-06-04 15:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见