24小时热门版块排行榜    

查看: 507  |  回复: 5
当前主题已经存档。

一生随袁

木虫 (正式写手)

[交流] 关于电泳问题

我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baisuilan

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
煮沸的时候加没加SDS呢?直接煮沸法裂解细胞,我觉得裂解可能不完全吧。另外煮的太久也会使蛋白降解。通常的做法是先加裂解液裂解,离心取上清之后再加上样bufer煮
2楼2009-06-03 21:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
引用回帖:
Originally posted by 一生随袁 at 2009-6-3 20:36:
我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?

没看明白你的问题。

上样前煮沸是为了让蛋白变性,但是如果你要做质谱,蛋白样品是不能煮沸的。
煮不煮与你能不能跑的出条带是没有关系的。
不过,告诉你一个快速看胶的方法,不必完全脱色,染色半个多小时后立即放入开水中煮,直到能看到条带为止。但是,如果你要做质谱,还是老老实实的脱色。。。。
3楼2009-06-03 21:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)

1. 没有看的很明白2.煮沸蛋白质指什么?3. SDS-PAGE有条带说明肯定是有蛋白的
4楼2009-06-03 21:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jin56419303

木虫 (小有名气)

楼主说的不清楚,煮沸单纯作为破菌也是可以,但是蛋白肯定容易被降解,要是跑SDS-PAGE的话需要先加SDS辅助裂菌效果才好
5楼2009-06-04 15:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008116068

木虫 (著名写手)

煮沸可能不完全破壁吧
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
6楼2009-06-07 09:21:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一生随袁 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
信息提示
请填处理意见