24小时热门版块排行榜    

查看: 406  |  回复: 5
当前主题已经存档。

一生随袁

木虫 (正式写手)

[交流] 关于电泳问题

我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baisuilan

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
煮沸的时候加没加SDS呢?直接煮沸法裂解细胞,我觉得裂解可能不完全吧。另外煮的太久也会使蛋白降解。通常的做法是先加裂解液裂解,离心取上清之后再加上样bufer煮
2楼2009-06-03 21:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 21:50
一生随袁(金币+1,VIP+0): 6-5 06:40
引用回帖:
Originally posted by 一生随袁 at 2009-6-3 20:36:
我想请教一个问题 蛋白质 煮沸提取 怎么跑不出带来 不过 蛋白质 做SDS-PAGE的时候 不是 上样以前 也加热与SDS结合 处理    为什么后者能跑出带, 而前者则没有带呢 ?

没看明白你的问题。

上样前煮沸是为了让蛋白变性,但是如果你要做质谱,蛋白样品是不能煮沸的。
煮不煮与你能不能跑的出条带是没有关系的。
不过,告诉你一个快速看胶的方法,不必完全脱色,染色半个多小时后立即放入开水中煮,直到能看到条带为止。但是,如果你要做质谱,还是老老实实的脱色。。。。
3楼2009-06-03 21:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)

1. 没有看的很明白2.煮沸蛋白质指什么?3. SDS-PAGE有条带说明肯定是有蛋白的
4楼2009-06-03 21:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jin56419303

木虫 (小有名气)

楼主说的不清楚,煮沸单纯作为破菌也是可以,但是蛋白肯定容易被降解,要是跑SDS-PAGE的话需要先加SDS辅助裂菌效果才好
5楼2009-06-04 15:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008116068

木虫 (著名写手)

煮沸可能不完全破壁吧
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
6楼2009-06-07 09:21:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一生随袁 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂; 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +6 wana_kiko 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见