24小时热门版块排行榜    

查看: 1299  |  回复: 13
当前主题已经存档。

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

[交流] 单酶切质粒(3-10Kb)问题请教

我想切3-10Kb质粒一个,BamH I和Ecol R 分别酶切,请问酶切时间1-2H好那还是过夜好,过夜酶切会产生影响吗?会出现弥散条带吗?请有经验者帮忙!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

你说的两种酶的活性都比较强,一般1到2小时就够了,如果切的情况不是很好,可以适当的延长时间,时间过长就不好了。希望对你有帮助。
2楼2009-06-03 14:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
2个酶都很好用,2个小时足够
过夜切没必要
3楼2009-06-03 15:37:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 16:26
按照酶活定义去切就好了
1ug 质粒
1U 酶
切1h
当然是用NEB或者相当级别的酶
4楼2009-06-03 16:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

多谢各位
5楼2009-06-03 18:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这两个酶都有星活性的,建议还是分步酶切,或者在通用Buffer中酶切时间短一些,我就使用这两个酶双酶切的,切了90min,效果很好的。
6楼2009-06-03 20:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
为何做单酶切?Eco I可以和绝大多数酶进行双酶切的阿。
酶切两个小时即可。
7楼2009-06-03 21:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanfeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
双酶切应该可以啊 2个小时应该可以了
8楼2009-06-03 22:01:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般的1-2个小时就足够了,准楼准顺利
9楼2009-06-03 23:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rest_cjt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-6-3 16:25:
按照酶活定义去切就好了
1ug 质粒
1U 酶
切1h
当然是用NEB或者相当级别的酶

质粒的质量怎么定?跑电泳照胶和ladder比对用软件分析?
10楼2009-06-04 01:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhlq_mail 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见