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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 酶切目的条带偏大，但测序结果正确。
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落日余晖34

木虫 (正式写手)
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酶切目的条带偏大，但测序结果正确。
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最近采用同源重组构建载体，在构建过程中发现，用双酶切切割构建好的载体时目的片段会比预期大小多几百bp，但是测序结果却是正确的。另外有时候，dl5000和dl10000的2000的条带在marker点在两端的时候会对不上，而相邻着点却能对上……请问各位虫友有遇到过这种情况吗？ps:目的片段大小为1300bp，在pcr验证质粒时是正确的，就是在酶切后跑胶发现会大几百bp，不知原因何在，求各位虫友给分析分析。

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1楼 2019-09-16 11:46:01
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-12-29 22:10:15
正常，电泳毕竟只能看个大概。以 测序结果为准

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18楼2019-09-16 12:07:42
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落日余晖34

木虫 (正式写手)
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35楼2019-09-16 13:30:59
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-12-29 22:10:37
引用回帖:
35楼: Originally posted by 落日余晖34 at 2019-09-16 13:30:59
我感觉偶尔出现一次可能比较正常，但是最近做的时候一直都是这样……
...

你知道有这个问题就好了，一般切的时候也没必要特别准，只要能分开，指示你要的条带就行了。

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36楼2019-09-16 16:20:28
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张志昊

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到了这种情况，再多跑一会，就会正常，不知道为啥

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37楼2019-12-29 18:04:00
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hdchina20102楼
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solarzhao3楼
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emmetchen6楼
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junwei20107楼
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?W痕8楼
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zhouguojund9楼
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还有谁！10楼
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峨眉小强11楼
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秋土豆香12楼
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weizhe3416楼
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zbg21900120楼
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Genifer27楼
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