应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA降解问题求助！
161/2返回列表12下一页
查看: 1776  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA降解问题求助！

我在试验中经常碰到有人问我引物和DNA反复冻融和使用对试验有无影响？为什么有影响？有什么影响？我无言，不知如何回答，请高手指教一二?


我的一师弟，ssr引物总是用，用完在桌子上放半天，可结果也没什么影响？无言！
另外,引物有必要在冰上融结在用吗？我有时比较急，直接用手暖或直接扔水浴锅里！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-01 16:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我有一条引物用过大半年，不停地反复冻融，好像影响不是很大。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-06-01 18:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反复冻融可能会使DNA降解,但不是一定的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-06-01 19:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)
我的引物-20℃存了俩月就不行了……难道和RP有关？…………
赞一下 回复此楼
4楼2009-06-01 19:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

再见苏摩

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般试验影响不会很大，不过个人觉得养成良好的实验习惯比较好，有些实验是否成功可能就会受到这些细小动作的影响
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-06-01 20:31:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-1 20:57
对与DNA来说，一般影响不大，不过引物最好还是分装一下，从总的里面分出一点，比如几微升，然后把它稀释成工作浓度，每次只用这一管，用完之后，再进行稀释，那样比较好点。虽然说不容易降解，但是不怕一万，就怕万一降解了，那就全遭了，既浪费金钱，又浪费时间，你说是不？
赞一下(7人) 回复此楼
朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
6楼2009-06-01 20:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Milanmy

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNA是否容易降解和溶解DNA的溶剂有关，如果用水溶解，有一定的概率水是酸性，这样就容易引起DNA降解。所以一般用TE溶解比较好，除非用TE会影响影响后续试验。比如Qiagen DNeasy kit的Elution Buffer的是pH9.0的TE。引物最好用TE配成100mM的母液，用水或TE稀释成工作液使用。基因组DNA用TE溶解，储存在4度，反复冻融会造成DNA的断裂。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-06-01 21:45:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反复冻融肯定是不好 但说有多大的影响 不好说 因为无论是引物还是模板都是有不同的 （保存体系及条件） 我做实验时 都是把所用的分装成小份 每份不用冻融几次就用完了 我建议你也这样
赞一下(1人) 回复此楼
海纳百川止于至善
8楼2009-06-01 21:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)

其实最重要的是无菌条件

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果你在P3实验室操作，估计冻融多次也没有事，如果污染了微生物估计几周就完蛋了。
赞一下(1人) 回复此楼
闹太套
9楼2009-06-02 00:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上的说法，主要是看无菌条件，如果无菌好的话多次冻融也没什么问题的。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-06-02 09:19:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhlq_mail 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 总分293求调剂 +4 加一一九 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:34 by barlinike
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 316求调剂 +8 梁茜雯 2026-03-19 8/400 2026-03-25 20:33 by 热情沙漠
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +3 小鱼爱有机 2026-03-25 3/150 2026-03-25 20:13 by qingfeng258
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭