应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA降解问题求助！
161/2返回列表12下一页
查看: 1734  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA降解问题求助！

我在试验中经常碰到有人问我引物和DNA反复冻融和使用对试验有无影响？为什么有影响？有什么影响？我无言，不知如何回答，请高手指教一二?


我的一师弟，ssr引物总是用，用完在桌子上放半天，可结果也没什么影响？无言！
另外,引物有必要在冰上融结在用吗？我有时比较急，直接用手暖或直接扔水浴锅里！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-01 16:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我有一条引物用过大半年，不停地反复冻融，好像影响不是很大。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-06-01 18:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反复冻融可能会使DNA降解,但不是一定的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-06-01 19:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)
我的引物-20℃存了俩月就不行了……难道和RP有关？…………
赞一下 回复此楼
4楼2009-06-01 19:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

再见苏摩

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般试验影响不会很大，不过个人觉得养成良好的实验习惯比较好，有些实验是否成功可能就会受到这些细小动作的影响
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-06-01 20:31:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-1 20:57
对与DNA来说，一般影响不大，不过引物最好还是分装一下，从总的里面分出一点，比如几微升，然后把它稀释成工作浓度，每次只用这一管，用完之后，再进行稀释，那样比较好点。虽然说不容易降解，但是不怕一万，就怕万一降解了，那就全遭了，既浪费金钱，又浪费时间，你说是不？
赞一下(7人) 回复此楼
朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
6楼2009-06-01 20:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Milanmy

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNA是否容易降解和溶解DNA的溶剂有关，如果用水溶解，有一定的概率水是酸性，这样就容易引起DNA降解。所以一般用TE溶解比较好，除非用TE会影响影响后续试验。比如Qiagen DNeasy kit的Elution Buffer的是pH9.0的TE。引物最好用TE配成100mM的母液，用水或TE稀释成工作液使用。基因组DNA用TE溶解，储存在4度，反复冻融会造成DNA的断裂。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-06-01 21:45:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反复冻融肯定是不好 但说有多大的影响 不好说 因为无论是引物还是模板都是有不同的 （保存体系及条件） 我做实验时 都是把所用的分装成小份 每份不用冻融几次就用完了 我建议你也这样
赞一下(1人) 回复此楼
海纳百川止于至善
8楼2009-06-01 21:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)

其实最重要的是无菌条件

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果你在P3实验室操作，估计冻融多次也没有事，如果污染了微生物估计几周就完蛋了。
赞一下(1人) 回复此楼
闹太套
9楼2009-06-02 00:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上的说法，主要是看无菌条件，如果无菌好的话多次冻融也没什么问题的。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-06-02 09:19:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhlq_mail 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂； 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭