24小时热门版块排行榜    

查看: 489  |  回复: 5
当前主题已经存档。

nicole-feng

新虫 (初入文坛)

[交流] 紧急求助:DNA PAGE求助!!!

!!!急

刚做这方面的实验,跑胶、染色一塌糊涂,忘有经验有耐心的各位兄弟姐妹给俺回答回答:

我现在有两条合成的随机引物,均为92bp,因为要转录RNA文库用的,所以就想在转录之前看看合成的质量,偶就想用PAGE检验一下,俺用了40% 19:1的丙烯酰胺混合液+Urea+TBE 跑了块175*200mm的凝胶(跑的高压胶),后来银染的过程中在第一步Fixing时胶就全部烂掉了. 这个胶太黏了,彻底胶状。。。很不好处理。。。
ps:如果我只是想看看合成的是否基本上是理想长度的引物,那是否可以用30的混合液配小胶,电压也用一般的跑呢?
不胜感激!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
30%的可以啊,最终PAGE胶浓度为15%即可
然后用预冷的TBE跑,如果怕降解就放冰上电泳
2楼2009-06-01 10:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

胶应该是有点问题,我记得浓度在12%时就很好了,不容易坏的
3楼2009-06-01 12:22:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

引物单子上跑引物的图不都是15%的尿素胶吗
4楼2009-06-01 18:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicole-feng

新虫 (初入文坛)

确实胶有点问题,解决了这个问题了。但是银染效果差,目的的条带上面很大一团拖尾的。。不知道是啥。。而且样品带染出来不是像marker一样是棕褐色(marker也没有拖尾现象),而是棕红色,还有背景有点暗茶色的感觉,这些可能是啥原因造成的?我已经很注意各方面了。。
5楼2009-06-08 20:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicole-feng

新虫 (初入文坛)

。。。我真鄙视我自己。。而且那一大团拖尾的东西染色时是有点应光亮的感觉的。。。
6楼2009-06-08 20:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nicole-feng 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +3 基诺咪客 2026-08-17 3/150 2026-08-17 15:25 by xinshengwu
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 9/450 2026-08-17 14:59 by wangze12014
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +3 angus9576 2026-08-17 6/300 2026-08-17 14:32 by 启萌科技
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 6/300 2026-08-17 13:58 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 11:46 by 4GBAYCdVQoK3
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见