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悲催的小王?

新虫 (初入文坛)

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8楼: Originally posted by 哈利波特2000 at 2020-02-10 13:39:41
可以交流一下吗?我也在做这一块...

我可以也参与交流一下吗?刚开始一头雾水

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11楼2021-01-22 11:37:17
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学术渣渣程

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 南工邓 at 2019-07-17 21:21:07
题主你好,我现在也在做这一方面的课题,可以交流一下。
我做的时候,就是直接放在室温冷却的,不过我使用热水浴,然后连同热水一起冷却,大概四个小时到室温。
然后DNA我是直接加buffer溶解,就是实验用到的缓冲 ...

你好,我最近也是做发卡DNA的相关研究,我的做法是DNA用TE缓冲液溶解的,然后95摄氏度4分钟,室温下放置十分钟,因为无法判定能否形成发卡结构,所以跑了一下凝胶电泳,结果显示发卡结构的单链和互补链能结合,但是是不完全结合的,而且对于单链的跑胶结果看,不论怎么处理,得到的跑胶结果相同,所以我现在不确定我的单链是不是发卡结构存在,请问您有什么好的建议嘛
12楼2021-12-08 09:16:44
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RCA.木子涵

新虫 (小有名气)

您好,打扰前辈,请问您最后形成发夹结构用到的条件是什么呢?还请您赐教

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13楼2022-01-18 19:39:18
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RCA.木子涵

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 南工邓 at 2019-09-09 19:48:10
互补的情况下,需要外力打开发夹结构,比如加热,然后能互补形成双链。两个稳定的发夹结构,一般是不会自己打开的...

您好,打扰前辈,请问您最后形成发夹结构用到的条件是什么呢?还请您赐教

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14楼2022-01-18 19:39:38
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RCA.木子涵

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 学术渣渣程 at 2021-12-08 09:16:44
你好,我最近也是做发卡DNA的相关研究,我的做法是DNA用TE缓冲液溶解的,然后95摄氏度4分钟,室温下放置十分钟,因为无法判定能否形成发卡结构,所以跑了一下凝胶电泳,结果显示发卡结构的单链和互补链能结合,但是 ...

您好前辈,请问您现在问题解决了吗?您形成发夹的条件是什么呢?

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15楼2022-01-18 19:40:19
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lzueducn

新虫 (初入文坛)

1.pcr仪里精确控制温度,缓慢形成发夹结构。2.要用一定ph和正离子的buffer,annealing目的是让hairpin的stem结构顺利配对,DNA杂交需要正离子稳定带负电的DNA双链结构
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16楼2025-01-04 01:01:32
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