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独家记忆fm

新虫 (小有名气)


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高效液相色谱柱堵了
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C18,4um的安捷伦高效液相色谱柱堵了,用5%的甲醇水0.1低流速冲洗,泵压不仅没有降低,反而越来越高是怎么回事

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小松鼠45

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异丙醇挺好用的,可以同时溶解盐离子和部分有机颗粒,所以是可以用异丙醇冲洗的。柱子堵了应该是你样品的问题,过滤处理后的样品要马上处理,比如发酵液,即便离心过滤处理,常温也就六个小时就可能有微生物长起来。不稳定的样品,比如容易絮凝的,容易氧化变色的,都可能在过滤处理后重新产生颗粒物,堵住柱子。建议以后要尽快跑样品,如果没办法马上跑,也应该在四度冰箱放置,上样品再检查一下是否有沉淀。盐离子沉淀后用水溶液比较高的溶液可以冲开,有机大分子,可以用异丙醇冲开。但是一些胶体大颗粒,还有菌体,是不怎么容易冲开的,只能尝试一下。建议尝试色谱纯异丙醇冲一下,不行就只能换一根柱子了。刚开始做实验确实容易掉坑里,帮实验室大师兄大师姐做半年免费劳动力,就是那种随叫随到,不管和自己实验有关无关都要认真做好的,就可以有效避免这些坑。

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20楼2019-05-24 00:22:27
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繁夏

版主 (知名作家)



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检查确定是泵堵了?

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7楼2019-05-23 19:28:49
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哀伤的骄傲

木虫 (职业作家)



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看是什么赌的,极性还是非极性的或者是不溶的

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8楼2019-05-23 19:44:49
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小松鼠45

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亲,这边建议用纯水冲呢,因为纯水柱压更高!

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9楼2019-05-23 19:50:12
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2019-05-23 18:24   回复  
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2846377833楼
2019-05-23 18:24   回复  
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199411cjy4楼
2019-05-23 18:24   回复  
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zfpd27665楼
2019-05-23 18:25   回复  
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tzynew6楼
2019-05-23 18:26   回复  
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