应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 紧急内参问题求解
51/1返回列表
查看: 663  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

田鼠117

银虫 (小有名气)

[交流] 紧急内参问题求解

最近实验中,根据文献采用了human β-actin gene的引物, 上游为: 5’-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3’, 下游为: 5’-CTCCTTAATG TCACGCACGATTTC-3’ .我自己查了PUBMED后,得出PCR结果应为1091bp,RT-PCR为538bp.但是在具体实验中却发现PCR与RT结果均为538bp.但同条件下所做的human β-globin gene显示存在差异,表明应该是PCR与RT-PCR结果.麻烦各位高手给分析下问题所在,非常感谢.我的结果如图,第一个是PCR，第二个为RT-PCR

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:26 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-05-20 08:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田鼠117

银虫 (小有名气)
是的，是这个意思，你能帮我看看是怎么回事吗？谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2009-05-20 10:34:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

amilie030312

金虫 (正式写手)
没看懂啥意思，是说你用RNA做模板做rt-pcr，再用DNA做模板做PCR，用的是同一对引物，但是两外显子中间有内含子所以rt-pcr和PCR的结果片段上有长度差异，但是现在两结果长度扩出来的一样，是这个意思吗？
赞一下 回复此楼
2楼2009-05-20 10:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
是不是污染了？你的模板cdna里边混有dna或者rt的不够彻底？建议设计引物在UTR端和polyA端，这样可以避免这种情况
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
4楼2009-05-20 14:38:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田鼠117

银虫 (小有名气)
我也怀疑过是污染，但是我的RT结果是正确的，反而是PCR结果不正确。
赞一下 回复此楼
5楼2009-05-20 20:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +4 蓝山月 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:21 by 绿色低碳化学
[考研] 316求调剂 +8 梁茜雯 2026-03-19 8/400 2026-03-25 20:33 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +8 顾九笙要谦虚 2026-03-24 12/600 2026-03-25 20:15 by 20021109
[考研] 07化学303求调剂 +4 睿08 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:15 by qingfeng258
[考研] 321求调剂 +3 璞玉~~ 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:07 by Zhanglab-TJU
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭