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不完美的m

新虫 (初入文坛)

[求助] 蓝白斑筛选出现非菌落的蓝色东西

本人小白,请教一下各位大神,最近在做分子克隆。在进行蓝白斑筛选的时候平板上出现了很小很小的蓝色的东西,白色的一个都没有,我想问下,那个蓝色的是什么东西?为什么会出现这种情况呢?注:1、我所克隆的分子片段2500左右,PCR产物回收后跑胶验证条带正常。2、按照PCR的体系(没有加引物,使用Taq DNApoly酶,没有dATP,用的dNTP代替的),72℃,反应10min。加A尾巴。之前也是这么做的。3、接着做连接(使用T-Vector。DH5a。按照标准操作进行的).涂板第二天出现蓝色东西,感觉菌落一个都没有长出来。不知道是什么东西,更不知道什么原因。求教!
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不完美的m

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 黑暗微光 at 2019-05-23 10:50:38
我最近也在做蓝白斑筛选,一般蓝斑表示非重组载体而白斑才是我们要的,白色的菌没有,可能是连接试剂盒有问题,用连接试剂盒给的那个DNA去试一下,看有没有白色菌落,如果有,说明你的模板有问题,如果没有白色菌落 ...

好的,谢谢。我的问题应该是,没有连接成功
10楼2019-05-24 08:31:32
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f?h?j?nv?h

新虫 (小有名气)

我的都是蓝斑。也不知道为什么

发自小木虫Android客户端
2楼2019-05-17 09:13:05
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请教各位

新虫 (小有名气)

3楼2019-05-23 10:25:37
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黑暗微光

新虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:49:30
我最近也在做蓝白斑筛选,一般蓝斑表示非重组载体而白斑才是我们要的,白色的菌没有,可能是连接试剂盒有问题,用连接试剂盒给的那个DNA去试一下,看有没有白色菌落,如果有,说明你的模板有问题,如果没有白色菌落,那就是你的试剂盒有问题。

发自小木虫Android客户端
4楼2019-05-23 10:50:38
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