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Western blot 转膜使用甲醇问题求教 已有2人参与
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Western blot转膜液里为什么要加20%甲醇？？我搜索并得到以下解释，但不确定是否正确： 1、甲醇可以可以减少电流，从而降低产热。 疑问：直接设置更低的转膜电压不就可以了，何必加甲醇。 2、甲醇可以去除蛋白上的SDS 疑问：SDS去除了如何保证蛋白向正极移动。 3、不加甲醇蛋白转不上膜 疑问：这个说法的原理是什么？我曾用过购买的10× 转膜液， 直接用水稀释即可使用，蛋白完全能顺利转上膜，之后也blot出了条带。 |
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我找到了其他课题组也用乙醇代替的回答。 我觉得降低电导防止过热没有必要用甲醇，毕竟太毒了，不划算，开始使就用冰的buffer，设置更小的电压就行了。 也有人表示转膜不用甲醇是可以的（活化的时候还是要的）。加了甲醇有利于蛋白分子更好的结合到膜上，等等。以下连接给你参考： https://www.researchgate.net/pos ... the_transfer_buffer |
6楼2019-04-12 19:37:02
lirol
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2楼2019-04-12 08:44:57
匿名
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3楼2019-04-12 08:54:57
4楼2019-04-12 15:46:32
200