| 查看: 1144 | 回复: 2 | ||
[求助]
接合转化做基因敲除遇到问题
|
| 我最近在做基因敲除，野生菌为鞘氨醇菌，克隆了目标基因上下游序列，中间加入卡那抗性基因，构建到了pEX8Tc载体上，之后转入到了SM10 λpir中与野生菌双亲接合转化，在LB平板上过夜结合后，涂布到了Km，Sm双抗平板上，结果长出许多菌落，之后划线到15%蔗糖LB平板也能生长，但是验证了长的菌株是SM10 λpir，并不是野生菌。在此之前已验证过野生菌是抗Sm，不抗的Km，并且可以在15%蔗糖LB平板生长；SM10 λpir（pEX8Tc）抗Km，不抗Sm，不能在15%蔗糖LB平板生长。接合之后怎么会出现这种情况了呢，希望哪位大神能帮忙解答一下，不胜感激！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有141人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
2楼2019-03-31 23:50:48
3楼2019-04-01 09:04:41