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Maria萌宝贝

银虫 (小有名气)

[交流] hi tail pcr LAD引物的N是AGCT里的任意一种吗? 已有6人参与

本人最近在用hi tail pcr 扩增植物基因启动子,有关LAD引物有一些问题子想问:
1、hi tail pcr  LAD引物的N是AGCT里的任意一种吗?那就是有好多种情况吗?还是I碱基?
2、LAD引物里设计的两个或三个碱基是根据什么设计的呢?
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:49
你可以查一下.简并并引物,你的技术我不了解,不过碱基表示的过程查简并引物有用

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2楼2019-03-28 20:37:35
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elmanbio

金虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:47:00
热不对称pcr,根据保守序列设计兼并引物,N是代表ATCG中的任何一种,通常你需要先比对序列以后在选择设计引物
3楼2019-03-29 09:38:10
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嗯,这就是我

新虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:47:13
我以前也是用tail扩增的,很难啊,超级看运气。
有两种引物,N和特异的。N直接随即合成就可以。

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4楼2019-04-20 20:39:00
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匿名

用户注销 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
5楼2019-04-23 13:31:01
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WinkyT

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2019-04-23 13:31:01
简单啊 按照刘耀光老师的文章做就行了,屡试不爽。不用买什么试剂盒,N就是任意碱基,其他情况自行百度简并碱基

你好,可以请教一下实验步骤吗,我扩出来的都是300bp左右的条带

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6楼2019-12-09 20:01:59
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xxqweasz

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by WinkyT at 2019-12-09 20:01:59
你好,可以请教一下实验步骤吗,我扩出来的都是300bp左右的条带
...

请问你问题解决了吗?可以交流一下吗?2755065187

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7楼2023-09-23 10:25:52
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