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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » hi tail pcr LAD引物的N是AGCT里的任意一种吗？
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Maria萌宝贝

银虫 (小有名气)

[交流] hi tail pcr LAD引物的N是AGCT里的任意一种吗？ 已有6人参与

本人最近在用hi tail pcr 扩增植物基因启动子，有关LAD引物有一些问题子想问：
1、hi tail pcr  LAD引物的N是AGCT里的任意一种吗？那就是有好多种情况吗？还是I碱基？
2、LAD引物里设计的两个或三个碱基是根据什么设计的呢？
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1楼 2019-03-28 20:23:06
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WinkyT

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2019-04-23 13:31:01
简单啊 按照刘耀光老师的文章做就行了，屡试不爽。不用买什么试剂盒，N就是任意碱基，其他情况自行百度简并碱基

你好，可以请教一下实验步骤吗，我扩出来的都是300bp左右的条带

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6楼2019-12-09 20:01:59
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:49
你可以查一下.简并并引物，你的技术我不了解，不过碱基表示的过程查简并引物有用

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2楼2019-03-28 20:37:35
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elmanbio

金虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:47:00
热不对称pcr，根据保守序列设计兼并引物，N是代表ATCG中的任何一种，通常你需要先比对序列以后在选择设计引物
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3楼2019-03-29 09:38:10
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嗯，这就是我

新虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:47:13
我以前也是用tail扩增的，很难啊，超级看运气。
有两种引物，N和特异的。N直接随即合成就可以。

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4楼2019-04-20 20:39:00
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