24小时热门版块排行榜    

查看: 251  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sgba0307

铁虫 (小有名气)

[交流] 原核表达相关问题

我是刚刚开始做这方面的好多都不懂,麻烦各位帮忙看一下,谢谢!
实验过程:扩增目的基因--------------- 双酶切目的基因------- 回收酶切的目的基因----回收的目的基因与双酶切后的质粒载体相连接-------原核表达

我所用的质粒具有氨苄抗性,
在目的基因和质粒载体连接之后具体怎么样来筛选哪些是已经连接上的?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

漫迹

金虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢提供,欢迎常来生物学板块
在氨苄平板上筛选,挑但菌落,快速提质粒,与载体做对照进行凝胶电泳,条带比载体带大的应该就是连上的了
4楼2009-05-14 16:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

x8q4h11

木虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢提供,欢迎常来。
这个简单   把连接好的质粒提出来跑个电泳看大小(应该为质粒+目的基因的大小),大小合适了再用双酶切进一步检测(确保连接正确)。
2楼2009-05-14 15:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

临风7071

木虫 (正式写手)


350784478(金币+1):谢谢提供
在氨苄平板上筛选,如果你的载体上有i]LacZ并且多克隆位点在里面,那么你可以用氨苄+蓝白斑筛选重组子,挑白色的就是重组子了
3楼2009-05-14 16:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
350784478(金币+2):谢谢提供,欢迎常来生物学板块
1、提好的质粒直接拿去跑电泳是错误的,至少要用单酶切鉴定
2、蓝白斑筛选是可行的,但也有一定的限制性
3、测序是最准的,你可以选择跑个菌落PCR,有带的送测序
5楼2009-05-14 16:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-23 3/150 2026-03-24 20:25 by 汪!?!
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
请填处理意见