24小时热门版块排行榜    

查看: 252  |  回复: 4
当前主题已经存档。

sgba0307

铁虫 (小有名气)

[交流] 原核表达相关问题

我是刚刚开始做这方面的好多都不懂,麻烦各位帮忙看一下,谢谢!
实验过程:扩增目的基因--------------- 双酶切目的基因------- 回收酶切的目的基因----回收的目的基因与双酶切后的质粒载体相连接-------原核表达

我所用的质粒具有氨苄抗性,
在目的基因和质粒载体连接之后具体怎么样来筛选哪些是已经连接上的?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢提供,欢迎常来。
这个简单   把连接好的质粒提出来跑个电泳看大小(应该为质粒+目的基因的大小),大小合适了再用双酶切进一步检测(确保连接正确)。
2楼2009-05-14 15:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

临风7071

木虫 (正式写手)


350784478(金币+1):谢谢提供
在氨苄平板上筛选,如果你的载体上有i]LacZ并且多克隆位点在里面,那么你可以用氨苄+蓝白斑筛选重组子,挑白色的就是重组子了
3楼2009-05-14 16:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

漫迹

金虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢提供,欢迎常来生物学板块
在氨苄平板上筛选,挑但菌落,快速提质粒,与载体做对照进行凝胶电泳,条带比载体带大的应该就是连上的了
4楼2009-05-14 16:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
350784478(金币+2):谢谢提供,欢迎常来生物学板块
1、提好的质粒直接拿去跑电泳是错误的,至少要用单酶切鉴定
2、蓝白斑筛选是可行的,但也有一定的限制性
3、测序是最准的,你可以选择跑个菌落PCR,有带的送测序
5楼2009-05-14 16:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sgba0307 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap-
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
请填处理意见