24小时热门版块排行榜    

查看: 2257  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

di_chen

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助启动子构建载体问题 已有1人参与

求助大家!!!我目前在克隆启动子,好不容易P出了2600bp左右的条带,回收之后构建到PBI121和PAbAi载体上,重复做了不少于20次,都能长出菌斑,但是鉴定都没有阳性克隆。我检查了回收的片段产物,酶切产物都没有问题,也试过了不同的比例(片段产物/酶切产物),但还是没有用。但这是我的毕业课题,也不能一直拖着吧,然后找生物公司帮忙做,他们看了我的序列说是靠近CDS区域的序列AT含量太高,GC含量低,并且是构建到低拷贝载体上,不容易做,但他们做了半个月了,也没啥动静,简直是急死我了。。。。。现在不知道要咋办了,所以请大家帮我看一下,有什么办法解决没有。不胜感激!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好运连连OK

新虫 (小有名气)

实在连接不上也可以考虑用全基因合成的方式,把你的目的片段直接在载体上合成

发自小木虫Android客户端
9楼2019-03-21 12:24:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

换另一个启动子。全合成启动子序列。重新设计引物定位到GC含量正常的区间

发自小木虫Android客户端
2楼2019-03-20 00:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenpp2006

新虫 (正式写手)

试试同源重组

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2019-03-20 05:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kangaroo0513

新虫 (正式写手)

可以考虑丢给我做(站短我哦)。。嘿嘿。。
4楼2019-03-20 11:21:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +4 月色c 2026-03-05 5/250 2026-03-05 17:17 by zhukairuo
[考研] 纺织、生物、化学、材料等专业 +3 Eember. 2026-03-05 7/350 2026-03-05 16:35 by Eember.
[考研] 【求调剂】293分环境工程求调剂材料/化工,服从调剂,抗压能力强! +6 xiiiia 2026-03-04 6/300 2026-03-05 09:44 by houyaoxu
[考研] 化学 0703求调剂 总分293 一志愿211 +9 土土小虫 2026-03-03 11/550 2026-03-05 09:26 by vfdbghn
[考研] 070300化学 280 一志愿太原理工 求调剂 +8 拾玖壹 2026-03-04 8/400 2026-03-05 08:52 by anny19840123
[考研] 一志愿985材料与化工 326分求调剂 +3 Hz795795 2026-03-04 3/150 2026-03-04 20:54 by wutongshun
[考研] 286 +6 ksncj 2026-03-04 6/300 2026-03-04 20:49 by lature00
[考研] 274求调剂 +8 一个学习者 2026-03-04 8/400 2026-03-04 20:35 by kakakapanpan
[考研] 292求调剂 +9 yhk_819 2026-02-28 9/450 2026-03-04 16:06 by sslc1985
[考研] 085601 材料工程 320 +6 和乐瑶 2026-03-03 6/300 2026-03-04 16:01 by chixmc
[考研] 能动297求调剂,本科川大 +4 邵11 2026-03-04 4/200 2026-03-04 15:29 by lylylyheart
[考研] 281求调剂 +3 我是小小葱葱 2026-03-03 5/250 2026-03-04 14:23 by kakakapanpan
[基金申请] 请问大家,研究风险与应对措施那里, 大家都怎么写呢 ? +3 cauasen 2026-03-02 3/150 2026-03-03 19:43 by Tide man
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +5 Qwertyuop 2026-03-01 5/250 2026-03-03 17:50 by 梅子鸭鸭
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +5 lr1212.. 2026-03-02 5/250 2026-03-03 15:26 by xingtian2025
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:46 by Iveryant
[考研] 291求调剂 +3 MuoLuo1312 2026-03-02 6/300 2026-03-03 12:13 by 热情沙漠
[论文投稿] 通讯作者写谁,问题是你意想不到的问题 15+3 阿尔法啊 2026-03-01 3/150 2026-03-03 09:13 by 北京莱茵润色
[考研] 298求调剂 +10 人间唯你是清欢 2026-02-28 14/700 2026-03-02 22:49 by 人间唯你是清欢
[考研] 285求调剂 +9 满头大汗的学生 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:29 by hypershenger
信息提示
请填处理意见