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求助启动子构建载体问题 已有1人参与
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| 求助大家！！！我目前在克隆启动子，好不容易P出了2600bp左右的条带，回收之后构建到PBI121和PAbAi载体上，重复做了不少于20次，都能长出菌斑，但是鉴定都没有阳性克隆。我检查了回收的片段产物，酶切产物都没有问题，也试过了不同的比例（片段产物/酶切产物），但还是没有用。但这是我的毕业课题，也不能一直拖着吧，然后找生物公司帮忙做，他们看了我的序列说是靠近CDS区域的序列AT含量太高，GC含量低，并且是构建到低拷贝载体上，不容易做，但他们做了半个月了，也没啥动静，简直是急死我了。。。。。现在不知道要咋办了，所以请大家帮我看一下，有什么办法解决没有。不胜感激！！！ |
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