| 查看: 2555 | 回复: 10 | |||
[求助]
PCR如何入门 已有3人参与
|
|||
|
大家好，小木虫小白上来发帖，求助各位大神。 我是学中药的，没有生物基础，最近因为接到项目开始做植物DNA提取，PCR反应和酶切再跑胶，跑出来的胶真是一塌糊涂，求问各位，有什么书/刊物/方法能够自学提升PCR和跑胶水平？ |
回复此楼» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有87人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
cry_2013
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 1960.8
- 散金: 342
- 红花: 6
- 帖子: 366
- 在线: 246.6小时
- 虫号: 3426497
- 注册: 2014-09-18
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
PCR这个说简单也简单，说复杂也挺复杂的，我没有专门学过PCR相关知识，做的也就是普通PCR，遇到问题也是从网上查查相关原因（其实也没遇到过太大的问题。。。。。。），不过入门的话我觉得你应该先查一下PCR原理，知道PCR是什么，也就知道每一步的意义了，然后就是模板、引物设计、扩增程序这一块吧，模板这块现在的试剂盒感觉都不太差，按说明书操作一般问题都不大的（制备模板样本太刁难除外啊），引物的话网上也有很多引物设计的方法和注意事项，我觉得模板质量没问题，引物只要二聚体，错配什么的不要太过分（主要是3'端尽量不要有错配），一般都没问题的，扩增程序这块，你用的酶说明书上都有参考程序的，退火温度我觉小范围内变化对扩增结果影响不会太大，另外延伸的时间一定要够啊，别说明书1000-2000bp/min就按2000走了，时间稍微宽裕点。另外跑胶不太好，如果是根本没扩出条带就算了，如果marker都没跑好，那肯定就是胶的问题了。我觉得PCR这个多做几次，遇到问题解决问题，慢慢就有经验了。不过楼主专门找PCR相关的书籍去学习挺好的，我也想过看书的，最终没看下去 ，以上废话挺多的，楼主觉得有用的就参考，觉得没用的就随便看看。。。 |
8楼2019-03-15 14:26:16
lizimu566
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 1834.1
- 散金: 14
- 红花: 4
- 沙发: 2
- 帖子: 606
- 在线: 114.8小时
- 虫号: 4221341
- 注册: 2015-11-15
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2019-03-13 16:11:19
 本帖仅楼主可见 |
3楼2019-03-13 18:46:56
4楼2019-03-13 19:36:49
 |
5楼2019-03-14 09:05:02
6楼2019-03-14 11:04:36
7楼2019-03-14 11:20:24
旭日读书
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 13085.5
- 散金: 285
- 红花: 4
- 沙发: 1
- 帖子: 2392
- 在线: 674小时
- 虫号: 3998838
- 注册: 2015-07-31
- 专业: 环境微生物学
|
我本科也是中药的，硕士刚刚进实验室没人教做分子生物学也是一塌糊涂，马上研三毕业，熬过去回过头来看，这一行真的是门槛相当低的了。有熟人带一个星期我觉得就够了，多多请假会的人。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2020-03-18 13:53:16
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 128 (高中生)
- 金币: 4550.4
- 散金: 50
- 红花: 22
- 帖子: 934
- 在线: 645.1小时
- 虫号: 0
- 注册: 2011-10-17
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
10楼2020-03-18 17:17:49
200