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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR如何入门
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mosaki

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR如何入门 已有3人参与

大家好，小木虫小白上来发帖，求助各位大神。
我是学中药的，没有生物基础，最近因为接到项目开始做植物DNA提取，PCR反应和酶切再跑胶，跑出来的胶真是一塌糊涂，求问各位，有什么书/刊物/方法能够自学提升PCR和跑胶水平？
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1楼 2019-03-13 15:19:57
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cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR这个说简单也简单，说复杂也挺复杂的，我没有专门学过PCR相关知识，做的也就是普通PCR，遇到问题也是从网上查查相关原因（其实也没遇到过太大的问题。。。。。。），不过入门的话我觉得你应该先查一下PCR原理，知道PCR是什么，也就知道每一步的意义了，然后就是模板、引物设计、扩增程序这一块吧，模板这块现在的试剂盒感觉都不太差，按说明书操作一般问题都不大的（制备模板样本太刁难除外啊），引物的话网上也有很多引物设计的方法和注意事项，我觉得模板质量没问题，引物只要二聚体，错配什么的不要太过分（主要是3'端尽量不要有错配），一般都没问题的，扩增程序这块，你用的酶说明书上都有参考程序的，退火温度我觉小范围内变化对扩增结果影响不会太大，另外延伸的时间一定要够啊，别说明书1000-2000bp/min就按2000走了，时间稍微宽裕点。另外跑胶不太好，如果是根本没扩出条带就算了，如果marker都没跑好，那肯定就是胶的问题了。我觉得PCR这个多做几次，遇到问题解决问题，慢慢就有经验了。不过楼主专门找PCR相关的书籍去学习挺好的，我也想过看书的，最终没看下去，以上废话挺多的，楼主觉得有用的就参考，觉得没用的就随便看看。。。
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8楼2019-03-15 14:26:16
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lizimu566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跟着师兄师姐多做几次是最好的方法了
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2楼2019-03-13 16:11:19
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匿名

本帖仅楼主可见
3楼2019-03-13 18:46:56
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mosaki

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lizimu566 at 2019-03-13 16:11:19
跟着师兄师姐多做几次是最好的方法了

哎 已经没有师兄师姐了 只有自己摸索

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4楼2019-03-13 19:36:49
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lizimu566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mosaki at 2019-03-13 19:36:49
哎 已经没有师兄师姐了 只有自己摸索
...

5楼2019-03-14 09:05:02
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xhw520lzz

金虫 (正式写手)
跟这个专业的同学做几次就可以，当年我也做过这个（我也是中药学专业的），
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6楼2019-03-14 11:04:36
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mosaki

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xhw520lzz at 2019-03-14 11:04:36
跟这个专业的同学做几次就可以，当年我也做过这个（我也是中药学专业的），

之前跟过，但是自己做的时候遇到问题就不知道怎么解决了

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7楼2019-03-14 11:20:24
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旭日读书

铁杆木虫 (著名写手)
我本科也是中药的，硕士刚刚进实验室没人教做分子生物学也是一塌糊涂，马上研三毕业，熬过去回过头来看，这一行真的是门槛相当低的了。有熟人带一个星期我觉得就够了，多多请假会的人。

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9楼2020-03-18 13:53:16
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匿名

用户注销 (正式写手)
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10楼2020-03-18 17:17:49
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