24小时热门版块排行榜    

查看: 3276  |  回复: 7

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

[交流] 在一段基因序列上设计引物却一直跑不出条带 已有4人参与

感觉设计了三对了,一直没有条带是为什么啊,循环数已经很多了,2000多bp,退火也调了几次

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melyliang

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
模板对?尝试进行温度梯度PCR,要是第一次设计引物的话看看网上引物设计要求,设计完让师姐师兄帮忙看看。

发自小木虫Android客户端
2楼2019-01-21 16:46:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elmanbio

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-01-24 12:49:59
1 确定你提取的模板没有问题,通过电泳检测
2 模板没有问题,那就是引物的问题了,通常来说体系也影响结果,但是引物的影响更大
3楼2019-01-22 08:48:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jona_0814

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1. 检查模板,确定模板浓度
2. 调整PCR体系
3. 换个酶试试。

我们有PCR酶试用小样,可以试用一下。
4楼2019-01-22 11:15:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2019-01-22 08:48:58
1 确定你提取的模板没有问题,通过电泳检测
2 模板没有问题,那就是引物的问题了,通常来说体系也影响结果,但是引物的影响更大

但是我设计了四五对引物了,每队引物我在dnaman上面都看了的,都是3bp配对左右

发自小木虫IOS客户端
5楼2019-01-22 20:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by melyliang at 2019-01-21 16:46:52
模板对?尝试进行温度梯度PCR,要是第一次设计引物的话看看网上引物设计要求,设计完让师姐师兄帮忙看看。

我不知道是不是这个基因含有可变剪切的原因,所以老是跑不出来

发自小木虫IOS客户端
6楼2019-01-22 21:41:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elmanbio

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 暴走的小鱼干 at 2019-01-22 20:49:59
但是我设计了四五对引物了,每队引物我在dnaman上面都看了的,都是3bp配对左右
...

那你只能考虑重新设计引物了,需要帮忙的话,可以私聊
7楼2019-01-24 14:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ll19841008

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以考虑巢式PCR或者降落PCR,一次PCR不一定可以看到什么?二次PCR增加浓度。
8楼2019-01-27 15:10:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暴走的小鱼干 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 6/300 2026-08-25 00:11 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见