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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达如何确定有表达
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pc1453

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达如何确定有表达 已有3人参与

原核表达过程中已经测序正确了，预试验的胶图上预测蛋白大小处没有明显条带，这时该如何判断是否有表达呢，又该如何确定表达的位置以及实际的蛋白大小呢
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1楼 2019-01-21 10:19:21
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Jona_0814

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-02-14 20:33:16
引用回帖:
6楼: Originally posted by pc1453 at 2019-01-23 08:49:01
蛋白胶上上的样包括了上清，破碎后的全蛋白，还有沉淀了，以及空载对照处理组也一起跑了，没有明显条带。...

有没有比空载多出来一条带呢？（你做对照了吗？）
如果没有的话，应该是蛋白没有被诱导表达出来。
调整一下诱导温度，诱导剂量登。你可以先小量诱导，摸索下条件。
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7楼2019-01-23 10:06:15
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
那就是没有了

发自小木虫Android客户端
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2楼2019-01-21 10:49:19
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pc1453

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2019-01-21 10:49:19
那就是没有了

测序也正确，确定带有目的基因的质粒也转化进去了，怎么会没有表达呢
赞一下 回复此楼
3楼2019-01-21 13:19:33
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melyliang

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:11
有标签的话可以做个western

发自小木虫Android客户端
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4楼2019-01-21 17:01:21
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