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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达如何确定有表达
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pc1453

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达如何确定有表达 已有3人参与

原核表达过程中已经测序正确了，预试验的胶图上预测蛋白大小处没有明显条带，这时该如何判断是否有表达呢，又该如何确定表达的位置以及实际的蛋白大小呢
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1楼 2019-01-21 10:19:21
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Jona_0814

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pc1453(渊博震天代发): 金币+3, 鼓励积极回帖 2019-01-22 14:41:33
从你的描述看，应该是没有表达。
你可以调整一下诱导表达的条件。
另外，你在蛋白胶上点的样只是上清吗？有的蛋白可以不是可溶性表达。把全菌和上清一起跑个胶。对比多出来哪个条带。
蛋白大小一般都是根据氨基酸序列预测就可了。
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5楼2019-01-22 11:20:43
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
那就是没有了

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2楼2019-01-21 10:49:19
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pc1453

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2019-01-21 10:49:19
那就是没有了

测序也正确，确定带有目的基因的质粒也转化进去了，怎么会没有表达呢
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3楼2019-01-21 13:19:33
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melyliang

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:11
有标签的话可以做个western

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4楼2019-01-21 17:01:21
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