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有关质粒pBR322的抑酶实验
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各位老师同学急求您的帮助: 我不是生化药学的,我现在在做有关抽提pBR322质粒(负超螺旋)的实验。挑菌,加6uL AMP,37°摇菌24小时,用试剂盒提取后,加25uLTE,提取出的质粒非常淡,最让我郁闷的是,加入Topo1酶(使其解旋)水浴15分钟后,竟然质粒看不到了,琼脂胶上什么都没有(怀疑分解了??)。 提取不成,于是我买了商业化的质粒好贵,3000多,用质粒+酶后,质粒变成偏上的两条带(relex and nicked??),与后面质粒+酶+上市药物或化合物后(抑酶活性)的条带差不多,文献报道药物肯定是有作用的,但是偶做不出来 ![]() ![]() ![]() 可请哪位可以指教一下,解释一下我的图片,不胜感激! |
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